FastPure® EndoFree Plasmid Maxi Kit

質(zhì)粒大提試劑盒 (DC202)

內(nèi)毒素含量極低，后續(xù)可做轉(zhuǎn)染級(jí)別實(shí)驗(yàn)

產(chǎn)量高，高拷貝質(zhì)粒產(chǎn)量達(dá)到 0.2 mg-1.5 mg

操作簡(jiǎn)便

保存條件 : 試劑盒除 RNase A 和內(nèi)毒素清除劑外，其他組分室溫保存；RNase A 保存于 -30℃ ~-15℃ ;  內(nèi)毒素清除劑 2℃ -8℃可以保存一個(gè)月，長(zhǎng)期保存放 -30℃ ~-15℃ ▲ 若低溫保存，溶液容易產(chǎn)生沉淀。在使用前務(wù)必將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫中放置一段時(shí)間，必要時(shí)可在 37℃水浴鍋中預(yù)熱 10 min，溶解沉淀，混勻后再使用。

產(chǎn)品概述

本試劑盒適用于提取 150 ml-300 ml 過(guò)夜培養(yǎng)的菌液，采用改進(jìn)的 SDS- 堿裂解法裂解細(xì)胞，粗提物通過(guò)內(nèi)毒素清除劑選擇性結(jié)合離心去除內(nèi)毒素，然后離心吸附柱內(nèi)的硅基質(zhì)膜在高鹽、低 pH 值狀態(tài)下選擇性地結(jié)合溶液中的質(zhì)粒 DNA，再通過(guò)漂洗液將雜質(zhì)和其它細(xì)菌成分去 除，最后用低鹽、高 pH 值的洗脫緩沖液將純凈質(zhì)粒 DNA 從硅基質(zhì)膜上洗脫。離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界著名公司特制吸附膜， 柱與柱之間吸附量差異極小，可重復(fù)性好，克服了國(guó)產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)定的弊端。不需要使用有毒的苯酚，氯仿等試劑，也不需要乙醇沉淀， 可快速提取 0.2 mg-1.5 mg 純凈的高拷貝質(zhì)粒 DNA，提取率達(dá) 80-90%。工藝配方清除內(nèi)毒素，內(nèi)毒素含量極低（<0.1 EU/μg DNA）， 細(xì)胞轉(zhuǎn)染效果非常好。也可直接用于酶切、PCR、體外轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)化、測(cè)序等各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

性能展示

產(chǎn)量高

用 FastPure®  Endofree Plasmid Maxi Kit 試劑盒提取大小為 3.0 kb、 5.0 kb、5.9 kb、21.5kb 不同大小的質(zhì)粒，1% 瓊脂糖膠電泳檢測(cè)， M：DL15000 DNA Marker (Vazyme #MD103)。結(jié)果顯示本試劑盒 針對(duì)不同大小的質(zhì)粒均具有較好的提取效果，產(chǎn)量高。

純度高

使 用 FastPure®  Endofree Plasmid Maxi Kit 提取的 M3K 的質(zhì)粒 進(jìn)行酶切驗(yàn)證，1% 瓊脂糖膠電泳檢測(cè)，M：DL5000 DNA Marker  (Vazyme #MD102)。結(jié)果顯示提取的質(zhì)粒純度高，對(duì)下游酶切反 應(yīng)無(wú)抑制作用。

操作流程概要

適用范圍

本產(chǎn)品適用 150 - 300 ml 過(guò)夜培養(yǎng)的菌液，大規(guī)模提取質(zhì)粒。

組分

RNase A：10 mg/ml，用于去除 RNA； Buffer P1：細(xì)菌懸浮液，第一次使用前請(qǐng)將 RNase A 加入到 Buffer P1 中； Buffer P2：細(xì)菌裂解液（含 SDS/NaOH)； Buffer P4：中和液； 內(nèi)毒素清除劑：可以有效去除質(zhì)粒粗提液中的內(nèi)毒素； Buffer PW：洗滌液，第一次使用前請(qǐng)按說(shuō)明加一定體積的乙醇； Buffer TB：洗脫緩沖液； FastPure DNA Maxi Columns：質(zhì)粒 DNA 吸附柱； Collection Tube 50 ml：濾液收集管。

自備材料

無(wú)水乙醇，異丙醇，50ml高速離心管

△ Buffer PW 需在使用前添加一定量的無(wú)水乙醇

提取流程

FastPure® EndoFree Plasmid Mini Kit

高產(chǎn)無(wú)內(nèi)毒，25 min 轉(zhuǎn)染級(jí)質(zhì)粒小提 (DC203)

產(chǎn)量高 提取效率高，質(zhì)粒 DNA 產(chǎn)量高達(dá) 50 µg
內(nèi)毒素殘留量 內(nèi)毒素殘留量 ≤0.1 EU/µg，下游可做轉(zhuǎn)染級(jí)別實(shí)驗(yàn)

快速 無(wú)需冷熱交替，25 min 內(nèi)即可完成提取

產(chǎn)品概述
本試劑盒適用于1 - 5 ml過(guò)夜培養(yǎng)的菌液，采用優(yōu)化的堿裂解法裂解細(xì)胞，通過(guò)硅膠膜吸附技術(shù)與特殊的溶液，可特異性結(jié)合質(zhì)粒并有效地去除內(nèi)毒素、蛋白等雜質(zhì)，整個(gè)提取過(guò)程僅需 25 min。提取的質(zhì)粒 DNA 內(nèi)毒素殘留低 (≤0.1 EU/μg)，可用于多種細(xì)胞的轉(zhuǎn)染及常規(guī)的分子實(shí)驗(yàn)。

性能展示（產(chǎn)量高）

分別使用 Vazyme #DC203( 簡(jiǎn)稱(chēng) V) 與市售競(jìng)品 (A、B、C、D、E、F、G、H、I)，按照各自流程提取 pUC57( 高拷貝 ) 和 M3K( 低拷貝 ) 的質(zhì) 粒，對(duì)提取產(chǎn)物進(jìn)行濃度測(cè)定 ( 圖 1A、B) 及跑膠檢測(cè) ( 圖 1C、D)。結(jié)果表明，Vazyme #DC203 提取的質(zhì)粒產(chǎn)量高、完整性好。

分別使用 Vazyme #DC203( 簡(jiǎn)稱(chēng) V) 與市售競(jìng)品 (A、B、C、D、E、F、G、H、I)，按照各自流程提取 pUC57( 高拷貝 ) 和 M3K( 低拷貝 ) 的質(zhì)粒， 對(duì)提取的產(chǎn)物進(jìn)行內(nèi)毒素殘留量的測(cè)定 ( 圖 2A、B)。結(jié)果表明，Vazyme #DC203 提取的質(zhì)粒內(nèi)毒素殘留量低，且優(yōu)于競(jìng)品。

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