-
B 淋巴細胞膜表面免疫球蛋白的檢查
發(fā)布時間： 2023-04-12 點擊次數： 1489次原理
SmIg 是B 細胞的抗原識別受體，也是B 細胞特異的表面標志，用直接免疫熒光法可檢查出SmIg。用熒光素標記的抗Ig 抗體，在一定條件下與淋巴細胞混合，熒光素標記的抗Ig 抗體可以與B 細胞表面的Ig 結合，在熒光顯微鏡下觀察可見B 細胞膜上出現熒光。此方法可用來鑒定B 淋巴細胞。材料與儀器
ICR 小鼠
異硫氰酸熒光素（FITC）標記的兔抗小鼠Ig 抗體 Hank's液
臺式離心機 離心管 吸管 移液管步驟
1. 采用頸椎脫臼法處死小鼠，解剖取出脾臟放入盛有6 ml Hank's液的平皿中，用100 目鋼網研磨，混勻。從中吸取1 ml細胞懸液放入一試管中，加滿Hank's液，離心1000 rpm，10 分鐘，洗滌細胞一遍。傾去上清，沉積的細胞恢復1 ml容積，即為約1x107/ml的細胞懸液。另取一支試管，吸取1x107/ml的細胞懸液0.4 ml加Hank's液3.6 ml，即為1x106/ml的細胞懸液。2. 取2 ml離心管兩只，各加入1x106 /ml的細胞懸液1 ml，用臺式離心機離心2000 rpm，3 分鐘，棄去上清液。一支加入熒光素標記的兔抗鼠Ig抗體100 ul，另一支不加抗體作對照，置4 ℃冰箱30 分鐘。3. 取出離心管，用Hank's 液洗滌細胞兩次，以去除游離的抗體，最后一次離心后棄去上清液，留少許回流液，混勻，滴片，用熒光顯微鏡觀察。注意事項
一、在滴片前要去除游離的抗體，以避免假陽性結果。
常見問題
實驗結果熒光顯微鏡觀察，落射激發(fā)光下SmIg 陽性細胞可見環(huán)狀或斑點狀熒光。用鎢絲燈光源透射光照明計數同一視野內淋巴細胞總數，共計數200～300 個淋巴細胞，算出其中SmIg 陽性細胞的百分數。深圳安培生物科技有限公司，是一家具有核心的技術實力、壹流的經營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè)?？偛吭O在廣東，服務面向全國。安培生物集進口試劑、實驗室耗材銷售、技術服務與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司，旨在為生命科學的發(fā)展提供壹流的產品與服務。本公司建立了涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學、信號傳導和神經科學等領域的產品供應線，在各個領域內向用戶提供世界前沿水平和質量穩(wěn)定的產品，安培生物致力于為廣大的科研機構、高等院校等優(yōu)質客戶提供優(yōu)質的產品、技術支持與服務。
- 下一篇：標記抗體的應用技術
- 上一篇：兔多克隆抗血清的制備
產品中心
Products
-
血清系列
-
細胞轉染
-
支原體清除
-
細胞凍存
-
實驗耗材
-
分子試劑
-
細胞增殖與凋亡
-
Biozellen系列
-
培養(yǎng)基
-
ELISA試劑盒
-
TOYOBO（東洋紡）
-
ZYMO RESEARCH
-
Greiner（格瑞納）
-
IKA（艾卡）
-
化學發(fā)光底物（ECL）
-
PROSPEC系列
-
Epigentek系列
-
微生物檢測
-
細胞生物學
-
Corning康寧
-
解離試劑
-
細胞類-實驗耗材
-
原代細胞
-
植物檢測系列試劑盒
-
SERANA
-
細胞系
-
生化試劑盒
-
環(huán)境檢測系列試劑盒（AKEN）
-
類器官培養(yǎng)
-
緩沖器和解決方案
-
生物三凝膠基質
-
細胞因子分子
-
生物樣本庫
-
蛋白研究系列
-
修飾檢測試劑盒
